肿瘤学论文_骨髓间充质干细胞条件培养液对多发
文章目录
文题释义：
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
1.1 设计
1.2 时间及地点
1.3 材料
1.4 方法
1.4.1 骨髓间充质干细胞培养和分组
1.4.2 流式细胞仪检测间充质干细胞表面标志物
1.4.3 结晶紫染色观察细胞形态
1.4.4 EdU荧光染色检测增殖情况
1.4.5 MTT法检测增殖情况
1.4.6 流式细胞仪和荧光染色法检测细胞凋亡情况
1.4.7 Real-time PCR检测BCL-2、BTK的mRNA表达
1.4.8 Western blot法检测BCL-2、BTK蛋白表达
1.5 主要观察指标
1.6 统计学分析
2 结果Results
2.1 间充质干细胞表面标记物的流式鉴定结果
2.2 结晶紫染色观察细胞形态和数量
2.3 EdU荧光染色检测细胞增殖情况
2.4 MTT检测细胞增殖情况
2.5 细胞凋亡率
2.6 凋亡基因BCL-2、BTK在mRNA、蛋白水平的表达
3 讨论Discussion
文章摘要:背景:近年来,骨髓微环境与多发性骨髓瘤细胞生长、存活及耐药性的关系成为科研人员研究热点,骨髓间充质干细胞条件培养液干预多发性骨髓瘤细胞株的实验鲜有报道。目的:探讨骨髓间充质干细胞条件培养液对多发性骨髓瘤细胞增殖的影响。方法:经Ficoll密度梯度离心法及贴壁纯化健康供者骨髓来源间充质干细胞,收集第3-5代骨髓间充质干细胞的上清培养基,超滤离心管制备浓缩骨髓间充质干细胞条件培养液,制备含10%人骨髓间充质干细胞条件培养液的1640完全培养基,诱导多发性骨髓瘤RPMI8226和U266细胞株培养48h,MTT法、EdU荧光染色检测细胞增殖能力;流式细胞仪和PI荧光染色检测细胞凋亡情况;Real-time PCR和Western blot检测细胞中BCL-2、BTK mRNA、蛋白表达水平。结果与结论:骨髓间充质干细胞条件培养液能促进多发性骨髓瘤细胞株的增殖（P <0.05）,抑制多发性骨髓瘤细胞的凋亡（P <0.05）,与BCL-2、BTK的mRNA和蛋白高表达密切相关（P <0.05）。结果表明,骨髓间充质干细胞条件培养液可促进多发性骨髓瘤细胞增殖。
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